Pemeriksaan leukosit

ABOUT HEALTH

Syara Inda, HEALTH ANALYST

Hematologi

a.       Judul : Pemeriksaan leukosit

b.     Tujuan : Untuk mengetahui jumlah sel leukosit /µl darah

c.    Prinsip : Darah diencerkan dalam pipet thoma leukosit dengan larutan yang bersifat asam lemah dan hipotonis. Kemudian dimasukkan ke dalam kamar hitung. Jumlah leukosit dihitung dalam volume tertentu, dengan menggunakan faktor konversi jumlah leukosit per µl darah dapat diperhitungkan

d.      Alat :

·         Pipet thoma leukosit

·         Kamar hitung Improved Neubauer

·         Cover glass

·         Mikroskop

e.       Bahan : Darah vena

f.        Reagent :

1.      Larutan Turk, yang memiliki komposisi sbb

·         Larutan Gentian Violet 1 % dalam air 1 ml

·         Asam Acetat Glacial 1 ml

·         Aquadest Add 100 ml

(Saring sebelum digunakan)

2.      HCl 1 %

Merupakan suatu larutan pengencer yang bagus untuk mengerjakan angka leukosit, karena larutan ini bekerja dengan cepat dan cukup untuk menghemolisiskan semua eritrosit yang tidak bernukleus

g.       Prosedur :

-         Mengisi pipet thoma leukosit

·      Mengisi darah sampai garis tanda 0,5 tepat

·      Menghapus kelebihan darah yang melekat pada ujung pipet

·      Memasukkan ujung pipet dalam reagent dengan posisi pipet sudut 45̊

·    Menghisap reagent secara perlahan sampai garis tanda 11. Jangan sampai        terjadi gelembung udara

·       Mengangkat pipet dan melepaskan karet penghisapnya

·   Mengocok pipet selama 15-30 detik, meletakkan horizontal bila tidak segera digunakan

Catatan : penggunaan reagent dapat memilih salah satu

-         Mengisi kamar hitung

·  Meletakkan kamar hitung yang benar-benar bersih dengan kaca penutup terpasang mendatar diatas meja

·      Mengocok pipet selama 3 menit terus-menerus, menjaga jangan sampai ada yang terbuang cairannya sewaktu mengocok

·      Membuang 3-4 tetes cairan dalam pipet dan menyentuhkan segera keujung pipet dengan sudut 30̊ pada permukaan kamar hitung dengan menyinggung pinggir kaca penutup

·      Membiarkan kamar hitung 2-3 menit agar leukosit dapat mengendap. Jika tidak segera dipakai disimpan dalam cawan petri tertutup yang berisi segumpal kapas basah

-         Menghitung sel

·    Menurunkan lensa kodensor dan mengecilkan diafragma pada mikroskop, meja harus dalam sikap rata air

·      Menggunakan lensa objektif 10×

·      Menghitung jumlah leukosit pada 4 bidang besar yang terletak pada sudut-sudut

·     Menghitung mulai dari kiri atas - ke kanan – bawah – ke kiri – bawah – ke kanan , dst …… (dalam satu bidang besar)

·  Sel-sel yang menyinggung garis kiri dan atas harus dihitung, namun yang menyinggung garis kanan dan bawah tidak boleh dihitung

-         Perhitungan sel

·    Pengenceran dalam pipet thoma leukosit 20×, jumlah semua sel yang dihitung dalam keempat bidang menunjukkan jumlah sel leukosit dalam 0,1 µl. Tinggi kamar hitung 1/10 mm, singkatnya jumalah sel dikali 50, berikut rumusnya.
      Jumlah sel leukosit : x. 1/t. P            

                                       A 

      Keterangan : x= jumlah sel yang ditemukan

                   1/t= tinggi kamar hitung (t=1/10)

                      P= pengenceran

                     A= luas bidang

h.      Nilai normal : 4000-10.000/ µl

      CONTOH PERHITUNGAN HASIL :

                         Jumlah sel leukosit : x. 1/t. P           

                                                                                           
                                                            A 

                                                                                      : 44 . 1/1/10. 20

                                                                                                4

                                                                                      : 44. 200

                                                                                             4

                                                                                      : 44. 50

                                                                                      : 2.200 /µl

i.       Kesimpulan : berdasarkan hasil dari contoh soal didapatkan hasil dibawah normal. Hasil yang tidak normal dapat disebabkan dari banyak faktor, yaitu dari faktor pre-analitik, analitik dan sebab penyakit. Pre analitik dari jumlah darah yang dipipet, pengenceran yang dilakukan didalam pipet, tidak mengocok pipet segera setelah mangambil larutan, tidak mengocok pipet sebentar sebelum mengisi kamar hitung, tidak membuang beberapa tetes sebelum mengisi kamar hitung. Analitik dari penghitungan sel yang menyinggung garis batas, kaca penutup yang tergeser karena tersentuh dengan lensa mikroskop, hal yang bertalian dengan kamar hitung. Sebab penyakit dengan penurunan jumlah leukosit adalah penyakit hemolitik, infeksi virus, malaria, pengaruh obat.